Mercoledì Kessler-GRM Obolensk

ISTRUZIONIsull'uso di una serie di reagenti per studi batteriologici"Mezzo nutritivo per la rilevazione di batteri del gruppo Escherichia coli secco" Terreno Kessler-GRM Obolensk

1. SCOPO

L'ambiente Kessler-GRM Obolensk è progettato per rilevare i batteri del gruppo Escherichia coli durante l'esame sanitario di oggetti ambientali.

1. caratteristica impostata

Medium Kessler-GRM Obolensk è una polvere fine, igroscopica, di colore giallo-grigiastro, sensibile alla luce.

Prodotto in lattine di polietilene da 250 g.

2.1. PRINCIPIO OPERATIVO

L'insieme dei componenti inclusi nel kit fornisce i requisiti nutrizionali per la crescita dei batteri del gruppo Escherichia coli e l'inibizione di alcuni tipi di microrganismi.

2.2. COMPOSIZIONE DELL'INSIEME

Il mezzo Kessler-GRM Obolensk è una miscela di componenti secchi al tasso, g/l:

1. CARATTERISTICHE ANALITICHE E DIAGNOSTICHE

Il terreno Kessler-GRM Obolensk deve fornire una crescita visivamente rilevabile di ceppi di test di Escherichia coli 675, Klebsiella pneumoniae 418, Citrobacter freundii 101/57 in tutte le provette inoculate sotto forma di torbidità diffusa del terreno e formazione di gas, ceppo di test Enterobacter aerogenes 10006 - sotto forma di torbidità diffusa del mezzo e debole formazione di gas, il ceppo di prova Pseudomonas aeruginosa 27/99 sotto forma di una leggera torbidità del mezzo senza formazione di gas dopo 22-24 ore di incubazione ad una temperatura di (37 ± 1 ) °C, nonché il ceppo di prova E. coli 675 sotto forma di torbidità diffusa del mezzo e formazione di gas dopo 22-24 ore di incubazione ad una temperatura di (43 ± 1) °C con inoculazione di 0,5 ml di una sospensione microbica di ciascun ceppo di prova da una diluizione di 10 -6:

Il terreno Kessler-GRM Obolensk dovrebbe sopprimere completamente la crescita del ceppo di prova Proteus vulgaris HX 19 222 in tutte le provette inoculate quando inoculate con 0,5 ml di sospensione microbica da una diluizione di 10 -4 e del ceppo di prova Staphylococcus aureus Wood-46 quando inoculate con 0,5 ml di sospensione microbica da una diluizione di 10 -1 dopo 44-48 ore di incubazione alla temperatura di (37±1) °C.

1. MISURE PRECAUZIONALI

Rispetto delle "Norme per la disposizione, le precauzioni di sicurezza, l'igiene industriale, il regime antiepidemico e l'igiene personale quando si lavora nei laboratori (dipartimenti, dipartimenti) delle istituzioni sanitarie ed epidemiologiche del Ministero della Salute" (Mosca, 1981).

1. ATTREZZATURE E MATERIALI

• Termostato che fornisce temperatura 37±1 °С
• Bilance da laboratorio 2 classi di precisione
• Autoclave
• Provette di vetro
• Pipette di vetro che consentono di prelevare volumi liquidi di 1 e 2 ml
• Cilindro graduato in vetro con una capacità di 1000 ml
• Piastre di Petri sterili
• Acqua distillata
• boccette
• Imbuti di vetro

1. CAMPIONI ANALIZZATI

Oggetti di ricerca in microbiologia sanitaria, ricerca scientifica.

1. Esecuzione dell'ANALISI

Gli studi di esempio sono condotti in conformità con le linee guida e i GOST pertinenti.

7.1. PREPARAZIONE ALL'ANALISI

Preparazione del mezzo Kessler-GRM.

23,0 g del farmaco vengono mescolati in 1 litro di acqua distillata. Far bollire per 2-3 minuti, filtrare attraverso un filtro di carta, versare 5 ml in provette sterili con galleggianti e sterilizzare in autoclave alla temperatura di 112°C per 20 minuti.

Il terreno di Kessler - terreno per l'isolamento degli enterobatteri sulla base della fermentazione del lattosio, secco, è una polvere omogenea, igroscopica, fotosensibile finemente dispersa di colore crema chiaro.

Composizione (in termini di 1 litro di mezzo finito):
Peptone enzimatico, secco - 4,0 g.
Idrolizzato di farina di soia - 4,0 g.
D(+)-lattosio - 8,0 g.
Bile, secca - 4,0 g.
Violetta di genziana - 0,024 g.
Carbonato di sodio - 0,2 g.

Terreno liquido per l'isolamento di enterobatteri (gruppo E. coli) sulla base della fermentazione del lattosio nello studio sanitario e batteriologico di prodotti alimentari e oggetti ambientali (acqua, acque reflue, ecc.).

Sciogliere 20 g del farmaco in 1 litro di acqua purificata, portare a ebollizione, far bollire per 2 minuti, se necessario, filtrare attraverso un filtro di carta, versare 3 ml in provette sterili con galleggianti (provette di Durham). Sterilizzare a 112°C per 20 minuti.

Il terreno preparato deve essere limpido, di colore porpora con leggera opalescenza.

Il terreno preparato può essere conservato al buio per non più di 7 giorni ad una temperatura di 2-8°C fino al momento dell'uso. Incubare le inoculazioni dei campioni studiati per 24-48 ore ad una temperatura di 37°C. La crescita di microrganismi in grado di utilizzare il lattosio cambia il colore del terreno da viola a viola pallido. I tubi di Durham devono accumulare gas. Allo stesso tempo, la crescita della microflora gram-positiva è assente o debolmente espressa.

L'invenzione riguarda la microbiologia sanitaria. Il terreno per la ricerca di batteri del gruppo Escherichia coli ha la seguente composizione, g/l di acqua di rubinetto: peptone enzimatico secco 3,0-5,0, bile bovina sterile 50,0-55,0, lattosio 4,0-5,0, violetta di genziana 0,036-0,04, pH 7.51. L'invenzione consente di ridurre il costo del mezzo nutritivo. 3 tab.

L'invenzione riguarda la microbiologia sanitaria e può essere utilizzata negli studi microbiologici sanitari di prodotti alimentari e lavaggi da oggetti ambientali per rilevare batteri del gruppo Escherichia coli. Terreno liquido selettivo noto di Kessler per la determinazione della capacità fermentativa dei batteri coliformi di formare acido e gas (Metodi di controllo microbiologico dei prodotti per l'infanzia, nutrizione clinica e loro componenti. Linee guida MUK 4.2.577-96. Ministero della Salute della Russia. Mosca, 1998 , P. 20 contenente, g/l: Peptone enzimatico secco - 10.0 Bile bovina sterile - 50.0 cm 3 Lattosio - 2.5 Acqua di rubinetto - 950.0 cm 3 Soluzione acquosa all'1% di violetta di genziana (cristallo violetto) - 4 cm 3 pH 7.51 C'è prove in letteratura che i microrganismi in grado di persistere nell'ambiente crescono efficacemente su terreni con una ridotta quantità di peptone.Biol.15 USA Univ.Maryland et Baltim.666.04 Biology Consolidated Volume 1995. Dati simili sono stati ottenuti dagli autori (vedi Tabelle 1, 2, 3). ukt in un rapporto di 1:10, che di per sé sono un substrato nutritivo aggiuntivo per i batteri. Lo scopo dell'invenzione è di ridurre il costo del mezzo nutritivo di 2-3 volte con qualità di crescita equivalenti al mezzo proposto e noto. L'obiettivo è raggiunto utilizzando un mezzo contenente, g/l di acqua di rubinetto: Peptone enzimatico secco - 3,0-5,0 Bile bovina sterile - 50,0-55,0
Lattosio - 4,0-5,0
Violetta di genziana - 0,036-0,044
pH 7,51
Esempio 1. Preparazione dell'ambiente. Peptone, bile bovina viene aggiunto a 1 dm 3 di acqua del rubinetto. La miscela viene fatta bollire mescolando a bagnomaria per 20-30 minuti. Quindi si filtra attraverso un filtro di garza di cotone, si aggiunge lattosio, si regola il volume a 1 dm 3 con acqua, si imposta l'acidità attiva a 7,51 unità di pH utilizzando soluzioni 1N NaOH o HCL e controllando il valore del pH sul potenziometro. Si aggiungono 4 cm 3 di una soluzione acquosa all'1% di violetta di genziana e si versano i volumi richiesti in provette o beute, si posizionano i galleggianti, si sterilizzano per (151) minuti a (1211) o C. Esempio 2. Terreno con ingredienti minimi . Il mezzo ha la seguente composizione, g/l di acqua di rubinetto:
Peptone enzimatico secco - 3.0
Bile di bovini sterile - 50.0
Lattosio - 4.0
Viola di genziana - 0,036
pH 7,51
Le qualità di crescita dell'ambiente sono presentate nella tabella. 1, 2, 3. Esempio 3. Mezzo con valori ottimali di ingredienti, g/l acqua di rubinetto:
Peptone enzimatico secco - 4.0
Bile di bovini sterile - 52.5
Lattosio - 4.5
Viola di genziana - 0,038 cm 3
pH 7,51
Le qualità di crescita dell'ambiente sono presentate nella tabella. 1. Esempio 4. Ambiente con valori massimi di ingredienti. Il mezzo ha la seguente composizione, g/l di acqua di rubinetto:
Peptone enzimatico secco - 5.0
Bile di bovini sterile - 55.0
Lattosio - 5.0
Viola di genziana - 0,04
pH 7,51
Le qualità di crescita dell'ambiente sono presentate nella tabella. 1, 3. Esempio 5. Determinazione delle qualità di crescita del mezzo mediante il metodo delle diluizioni seriali. La coltura di E. coli 221 viene inoculata in una provetta con 5 ml di brodo di carne e peptone. Dopo 4 ore di incubazione della coltura a 37°C, un'ansa microbiologica della coltura in brodo è stata inoculata in provette con 10 ml di terreno Kessler con lattosio, preparato da terreno commerciale secco (TOO "Quadra" TU 10.02.875- 90) e il mezzo proposto con varie concentrazioni di peptone uno%; 0,5%; 0,4%; 0,3%; 0,2%. Da ciascuna provetta dopo l'incubazione delle colture a 37 o Con durante il giorno produrre un numero di diluizioni seriali, a partire da 10 -1 a 10 -12. Per la diluizione viene utilizzato il mezzo Kessler, preparato secondo le istruzioni da un mezzo secco. Tutte le provette con diluizioni vengono incubate per un giorno a 37°C e alla fine del periodo si rileva la torbidità e la formazione di gas. Da tutte le provette, comprese le restanti trasparenti, si effettua la semina sui settori delle coppe con il mezzo Endo. Il giorno successivo all'incubazione delle colture a 37° Con si tiene conto della presenza della crescita di caratteristiche colonie rosse con lucentezza metallica nelle opportune diluizioni, determinando così la qualità di crescita dell'ambiente con un certo contenuto di peptone. Esempio 6. Determinazione delle qualità di crescita del mezzo mediante il metodo della semina dosata. La coltura di Citrobacter freundii 227 viene inoculata su agar carne-peptone smussato, coltivato a 37°C per 18 ore.Utilizzando lo standard di torbidità si prepara 1 ml. una sospensione di coltura in soluzione salina e produrre una serie di diluizioni seriali in soluzione salina ad una concentrazione di 1000 micron. corpi in 1 ml, 500 b.w.; 100 bw; 10 b.w. in 1 ml. In provetta con 10 ml del mezzo proposto con una concentrazione di peptone dell'1%; 0,5%; 0,4%; 0,3%; 0,2% e 10 ml di mezzo di Kessler con lattosio, preparato da un mezzo commerciale secco, inoculare 1 ml di ciascuna delle diluizioni preparate della sospensione batterica. Le colture vengono incubate a 37°C per un giorno a 37°C e tengono conto della crescita nei rispettivi settori delle caratteristiche colonie rosa scuro (vedi tabella 3).

Reclamo

Terreno Kessler modificato per la ricerca di batteri del gruppo Escherichia coli, contenente peptone enzimatico secco, bile bovina sterile, lattosio, violetta di genziana, acqua di rubinetto, caratterizzato dal fatto di contenere i suddetti componenti nel seguente rapporto, g/l di acqua di rubinetto:
Peptone enzimatico secco - 3.0 - 5.0
Bile di bovini sterile - 50,0 - 55,0
Lattosio - 4,0 - 5,0
Viola di genziana - 0,036 - 0,04
pH 7,51.

Brevetti simili:

L'invenzione si riferisce al campo della medicina, e più specificamente alla microbiologia medica, e può essere utilizzata per la diagnosi di laboratorio della patologia gastroduodenale associata all'Helicobacter pylori, basata sulla rilevazione di questi microrganismi in campioni bioptici estratti durante l'endoscopia, e la determinazione della loro contaminazione batterica

introduzione

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Descrizione 7974-00039

Descrizione del mezzo di crescita secco di Kessler

progettato per rilevare i batteri del gruppo Escherichia coli sulla base della fermentazione del lattosio durante l'esame sanitario e batteriologico di prodotti alimentari e oggetti ambientali.

Mezzo nutritivo secco a tempo medio di Kesslerè una polvere giallo-grigiastra finemente dispersa, igroscopica, fotosensibile.

Specifiche del mezzo nutriente secco di Kessler

Composto:

Peptone secco enzimatico, idrolizzato pancreatico di farina di pesce, lattosio, bile secca purificata, cristalvioletto, carbonato di sodio.

Preparazione:

23,0 g del farmaco vengono mescolati in 1 litro di acqua distillata. Far bollire per 2-3 minuti, filtrare attraverso un filtro di carta, versare 5 ml in provette sterili con galleggianti e sterilizzare in autoclave alla temperatura di 112°C per 20 minuti.

Il mezzo finito è viola.

Il terreno sterile può essere utilizzato per 4 settimane se conservato a temperatura
2-8°C, in un luogo buio.

Principio operativo:

La combinazione dei componenti che compongono il terreno fornisce i requisiti nutrizionali per la crescita e la rilevazione dei batteri del gruppo Escherichia coli sulla base della fermentazione del lattosio e dell'inibizione di alcuni tipi di microrganismi.

Analizzando:

Gli studi sui campioni sono condotti in conformità con le linee guida metodologiche e gli standard statali pertinenti.

Incubare a una temperatura di (37 ± 1) ° C per 24-48 ore, E. coli inoltre a una temperatura di (43 ± 1) ° C per 24 ore.

Controllo di qualità:

Da consumarsi preferibilmente entro: 2 anni.

In questa sezione " MEZZI NUTRIENTI» Puoi ordinare e acquistare Mezzo nutritivo secco a tempo medio di Kessler. Per selezionare un altro modello dalla categoria " MEZZI NUTRIENTI» è necessario accedere al menu principale o utilizzare i link in fondo alla pagina. Se c'è un'istruzione nel nostro database Mezzo nutritivo secco a tempo medio di Kessler.
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• Istruzioni per l'installazione e l'uso
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• Manuale di addestramento
• Manuale d'uso e di servizio
• Manuale di riparazione (schema elettrico)
• Istruzioni per la manutenzione
• Manuale di installazione
• Manuale di servizio e installazione
• Istruzioni per l'uso e la manutenzione
• Manuale operativo
• Procedura di verifica
• Schema elettrico
• Manuale d'uso
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• Catalogo (elementi, ricambi, ecc.)
• Metodo di prova
• Metodo di sintonizzazione
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• Materiali metodici
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• Specifiche
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